proses ekstraksi silymarin
SilymarinCampuran flavonolignan yang memiliki banyak aktivitas farmakologis diperoleh dari buah milk thistle (Silybum marianum L. Gaertner). Karena kandungan lipid yang tinggi dalam buah thistle, Farmakope Eropa merekomendasikan proses ekstraksi dua langkah. Pertama, buah dihilangkan lemaknya selama 6 jam, menggunakan n-heksana; kedua, silymarin diekstraksi dengan metanol selama 5 jam lebih.
Data yang disajikan menunjukkan bahwa proses ekstraksi Soxhlet tradisional yang sangat lama ini dapat dipersingkat menjadi beberapa menit menggunakan ekstraksi cairan bertekanan (PLE). PLE juga memungkinkan untuk menghilangkan tahap penghilangan lemak yang diperlukan dalam prosedur tradisional, sehingga menyederhanakan prosedur ekstraksi silymarin dan mencegah hilangnya silymarin yang disebabkan oleh penghilangan lemak. Pemulihan PLE yang diperoleh di bawah kondisi ekstraksi yang dioptimalkan jelas lebih baik daripada yang diperoleh dengan prosedur ekstraksi Soxhlet yang direkomendasikan Farmakope.
Hasil PLE dari silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A dan isosilybin B dalam aseton masing-masing adalah 3,3, 6,9, 3,3, 5,1, 2,6 dan 1,5 mg / g buah yang tidak dihilangkan lemaknya. Ekstraksi Soxhlet 5-jam dengan metanol pada buah-buahan yang dihilangkan lemaknya hanya menghasilkan ∼72% dari jumlah silymarin yang diperoleh dalam 10 menit PLE pada suhu 125 ° C.
Apa itu Silybum?
Silybum marianum L. Gaertner, biasa dipanggil sebagaimilk thistle, milk thistle yang diberkati, Marian Thistle, Mary Thistle atau Saint Mary' s Thistle, adalah tanaman tahunan atau dua tahunan dari keluarga Asteraceae. Tanaman yang awalnya tumbuh di Eropa Selatan dan Asia, kini ditemukan di seluruh dunia (1). Gulma yang menyusahkan ini saat ini dibudidayakan sebagai tanaman obat dan merupakan salah satu tanaman obat terpenting di Eropa.
Milk thistle telah digunakan untuk tujuan pengobatan selama lebih dari 2000 tahun, paling umum untuk pengobatan penyakit hati (sirosis dan hepatitis), serta untuk melindungi hati dari zat beracun (2-5). Minat penelitian terbaru tentang tanaman ini telah dirangsang oleh penelitian yang menunjukkan aktivitas antitumornya yang sangat tinggi. Ekstrak dari tanaman sekarang sedang diteliti secara intensif dalam percobaan kemoprevensi kanker, dan dalam perbaikan efek samping kemoterapi (6). Laporan terbaru menunjukkan bahwa ekstrak dari tanaman ini juga dicirikan oleh banyak aktivitas farmakologis lainnya, seperti efek antiinflamasi dan antifibrotik (2, 7, 8).
Silymarin, campuran flavonolignan yang menunjukkan banyak aktivitas farmakologis, diperoleh dari biji milk thistle (Silybum marianum L. Gaertner). Prosedur umum yang digunakan sejauh ini untuk ekstraksi silymarin terutama didasarkan pada metode ekstraksi pelarut suhu tinggi yang lambat. Kelemahan yang terkait dengan teknik ini telah mengarah pada pencarian proses ekstraksi alternatif baru yang juga dapat meningkatkanekstrak silymarinkualitas. Yang terakhir ini sangat penting dalam aplikasi silymarin. Ekstrak silymarin yang diperoleh, pada kenyataannya, dapat mengandung residu organik beracun yang perlu dihilangkan untuk memenuhi penerimaan konsumen.
Dalam upaya untuk meningkatkan proses ekstraksi silymarin dan membuatnya lebih efektif dan ramah lingkungan, ekstraksi pelarut dengan bantuan gelombang mikro baru-baru ini, ekstraksi pelarut dengan bantuan ultrasound, ekstraksi cairan bertekanan, ekstraksi dengan bantuan enzim, ekstraksi cairan superkritis, dan terutama ekstraksi air subkritis juga dikenal sebagai metode ekstraksi air panas bertekanan telah dikembangkan dan diterapkan.
Bahan dan metode
Bahan tanaman
Buah kering S. marianum L. Gaertner dibeli dari apotek lokal (Lublin, Polandia) pada musim gugur 2011. Sampel yang mewakili cukup besar dari bahan tanaman (kira-kira 500 g) digiling dan diayak untuk mendapatkan ukuran partikel 0,4 mm. Bagian material yang ditimbang dengan tepat digunakan untuk ekstraksi.
Bahan dan reagen
Ekstrak kering standar S. marianum L. Gaertner dan silybin B (dengan kemurnian 98%), diterapkan sebagai standar, dibeli dari Sigma-Aldrich, Polandia. Aseton, etil asetat, asam fosfat, n-heksana (semuanya dari kelas reagen analitik) dan metanol (kelas reagen analitik dan kelas HPLC) dibeli dari Pabrik Kimia Polandia (POCh, Gliwice, Polandia). Air dimurnikan menggunakan sistem Milli-Q dari Millipore (Millipore, Bedford, MA, USA). Gelas netral, diperoleh sebagai hadiah dari pabrik gelas lokal (fraksi 0,4-0,6 mm), diaplikasikan sebagai zat pendispersi dalam sel PLE.
Ekstraksi cairan bertekanan
PLE dilakukan dengan instrumen Dionex ASE200 (Dionex Corp., Sunnyvale, CA, USA). Bahan tanaman (0,5 g) dicampur dengan bahan inert (kaca netral) dan ditempatkan ke dalam sel ekstraksi baja tahan karat 22 mL yang berisi kertas saring di bagian bawah. Lingkaran lain dari kertas saring ditempatkan di bagian atas sel ekstraksi. Terakhir, sel ditutup rapat dan dimasukkan ke dalam oven pemanas.
Isi sel diekstraksi pada tekanan operasi 60 bar. Pada akhir proses, sampel yang diekstraksi dibilas menggunakan pelarut volume yang setara dengan 60% dari volume sel ekstraksi. Akhirnya, sampel dibersihkan selama 60 detik dengan menerapkan nitrogen bertekanan (150 psi.), Dan ekstrak dikumpulkan ke dalam botol kaca 60 mL dengan tutup karet berlapis Teflon. Volume ekstrak yang dikumpulkan adalah antara 25 dan 31 mL, tergantung pada kepadatan kemasan sel ekstraksi. Ekstrak yang diperoleh dipindahkan ke dalam labu ukur 50 mL dan diisi hingga volumenya menggunakan jenis pelarut yang sesuai. Tiga ekstraksi independen dilakukan dalam kondisi yang sama. Di antara proses tersebut, sistem dicuci dengan pelarut ekstraksi yang sesuai.
Parameter PLE yang diteliti adalah jenis pelarut (metanol, aseton dan etil asetat), suhu (50, 75, 100, 125 dan 150 ° C), waktu (5, 10, 15 dan 20 menit) dan jumlah siklus ekstraksi (1 –5). Untuk proses penghilangan lemak PLE, n-heksana diaplikasikan sebagai pelarut, dan parameter yang diteliti adalah suhu (50 dan 100 ° C) dan waktu (5 dan 10 menit) penghilangan lipid. Ekstrak aseton dan etil asetat diuapkan sampai kering dalam vakum dan dilarutkan kembali dalam metanol sebelum analisis kromatografi.
Ekstraksi soxhlet
Ekstraksi lengkap dalam peralatan Soxhlet dilakukan dengan menggunakan 2,0 g bagian material. Sampel yang ditimbang dengan tepat dipindahkan ke bidal kertas. Bidal yang telah diisi dimasukkan ke dalam ekstraktor Soxhlet 100 mL. Ekstraksi dilakukan dalam proses dua langkah (n=3). Pada langkah pertama prosedur, bahan tanaman dihilangkan lemaknya selama 6 jam menggunakan 75 mL n-heksana. Kedua, silymarin diekstraksi selama 5 jam dengan 75 mL metanol. Setelah didinginkan hingga suhu kamar, ekstrak yang diperoleh dipindahkan ke labu ukur 100 mL, yang selanjutnya diisi dengan metanol hingga volumenya. Tiga ekstraksi independen dilakukan.
Analisis kromatografi ekstrak
Pengukuran HPLC dilakukan pada Dionex Liquid Chromatograph (Dionex Corp.) yang terdiri dari selungkup kromatografi (LC20) yang berisi katup injeksi otomatis PEEK yang dilengkapi dengan loop sampel 10 μL, pompa gradien (GP50), detektor absorbansi (AD25) dan detektor larik fotodioda (PDA100). Seluruh sistem kromatografi berada di bawah kendali sistem akuisisi data PeakNet6. Pemisahan kromatografi dilakukan pada 40 ° C menggunakan kolom Prodigy ODS-2 (5 μm, 250 × 4.6 mm, ID) (Phenomenex, Torrance, CA, USA). Fase gerak A adalah campuran metanol dengan larutan asam fosfat encer yang mengandung 0,5 mL asam fosfat 75% dalam 100 mL larutan (35: 65, v / v). Fase gerak B adalah campuran metanol dengan larutan asam fosfat encer yang mengandung 0,5 mL asam fosfat 75% dalam 100 mL larutan (50: 50, v / v). Laju aliran 0,8 mL / menit. Analisis dilakukan dalam gradien fase gerak dengan persentase B dalam A bervariasi sebagai berikut: konsentrasi awal, 0% B; 28 menit, 100% B; 35 menit, 100% B, 36 menit 0% B. Sebelum analisis selanjutnya, kolom diimbangi menggunakan fase gerak yang mengandung 0% B selama 20 menit. Masing-masing ekstrak dianalisis HPLC tiga kali. Panjang gelombang untuk mendeteksi flavonolignan ditetapkan pada 288 nm, dan spektrum UV-Vis dari 210 hingga 500 nm juga dicatat untuk karakterisasi puncak.
Analisis kualitatif ekstrak dilakukan dengan membandingkan waktu retensi puncak dan spektrum UV-Vis dalam ekstrak sehubungan dengan sampel silymarin kering standar. Untuk menyiapkan larutan silymarin kering standar, sebagian 0,02-g sampel yang mengandung 5,0 mg silybin A + B dilarutkan dalam 50 mL metanol. Puncak untuk silychristin, silydianin, silybin A, silybin B, isosilybin A dan B muncul pada waktu retensi masing-masing 15.1, 17.4, 27.5, 29.1, 33.6 dan 34.8 menit. Analisis kuantitatif didasarkan pada standar silybin B, dan metode standar eksternal digunakan. Kurva kalibrasi dihasilkan dari lima konsentrasi senyawa dalam kisaran konsentrasi 0,1–1,0 mg / mL. Tiga pengukuran luas puncak untuk setiap konsentrasi larutan standar dilakukan. Parameter karakteristik dari kurva kalibrasi yang diperoleh adalah sebagai berikut: kemiringan, 0,516 dan intersep, 0,003. Kurva kalibrasi ternyata linier dalam kisaran konsentrasi yang diuji. Koefisien korelasi ditemukan menjadi> 0,995. Karena kesulitan untuk membeli standar silychristin, silydianin, silybin A, isosilybin A dan B, jumlah senyawa ini dihitung dengan menghubungkan respon kromatografinya dengan kurva kalibrasi untuk silybin B.
Analisis statistik
Semua data dinyatakan sebagai mean ± standar deviasi (SD). Analisis varian (ANOVA) dan uji F digunakan untuk menilai pengaruh kondisi PLE terhadap hasil silymarin. Nilai rata-rata dianggap berbeda secara signifikan ketika hasil parameter yang dibandingkan berbeda pada tingkat signifikansi P=0,05. Untuk memeriksa signifikansi setiap koefisien Fisher, nilai-P digunakan.
Hasil
Gambar 1a menyajikan kromatogram khas ekstrak PLE yang diperoleh dari buah S. marianum L. Gaertner, sedangkan Gambar 1b menunjukkan kromatogram ekstraksi silymarin dari larutan milk thistle yang dibuat dengan melarutkan ekstrak kering standar S. marianum L. Gaertner dalam metanol (1). mg / mL). Analisis kromatogram ekstrak PLE atau Soxhlet dengan larutan standar (waktu retensi, spektrum UV-Vis dan indeks kemurnian puncak) membuktikan bahwa kondisi kromatografi yang diterapkan memungkinkan resolusi yang cukup dari senyawa yang diperiksa, puncak dinomori dari 1 hingga 6, dari komponen matriks sampel. Puncak tersebut diidentifikasi sebagai: (1) silychristin, (2) silydianin, (3) silybin A, (4) silybin B, (5) isosilybin A dan (6) isosilybin B, masing-masing.
Bagaimana cara mengekstrak milk thistle?
Tidak seperti kebanyakan herba, biji milk thistle tidak dapat diekstrak dengan baik di dalam air, jadi jangan mencoba membuat secangkir teh darinya! Alih-alih makan biji tanah segar, atau dapatkan kapsul berkualitas baik. Jika menggunakan bijinya belilah utuh lalu giling sesuai kebutuhan (saya menggunakan penggiling kopi untuk membuatnya menjadi bubuk kasar). Bijinya terasa berminyak, manis dan pahit sekaligus - mungkin rasanya yang didapat, tetapi sama sekali tidak tidak enak. Mulailah dengan mengonsumsi 1/2 hingga 1 sendok makan per hari yang ditaburkan pada makanan Anda dan lihat bagaimana rasanya bagi Anda, sesuaikan jumlahnya sesuai kebutuhan.
Bahan
1 cangkir air hangat
1 cangkir 100 bukti alkohol Saya menggunakan vodka
¾ Untuk 1 cangkir biji milk thistle digiling jika memungkinkan
Instruksi
Sterilkan Mason jar yang digunakan dengan menaruhnya dalam air mendidih selama kurang lebih 10 menit, atau dengan meletakkannya di rak dalam oven dengan suhu sekitar 250 derajat selama 15 menit.
Tuang semua bahan ke dalam stoples Mason.
Tempatkan tutup baru pada toples, dan kencangkan dengan kuat menggunakan cincin.
Kocok stoples dengan kuat selama sekitar 1 menit.
Taruh toples di tempat gelap yang sejuk selama lima minggu.
Kocok stoples setiap hari untuk memastikan biji milk thistle tidak mengapung ke atas, dan terisi sepenuhnya dengan alkohol dan air.
Di akhir minggu yang ditentukan, saring milk thistle dari cairan melalui saringan jaring halus - simpan cairannya. Jika Anda tidak memiliki saringan jaring halus, gunakan saringan kecil dan / atau lapisi saringan dengan beberapa penyaring kopi untuk memperkecil ukuran bukaan.
Berapa lama milk thistle bekerja?
Biji milk thistle dapat melindungi sel hati dari bahan kimia dan obat-obatan beracun. Ia juga tampaknya memiliki efek penurun gula darah, antioksidan, dan anti-inflamasi.
Perbaikan parameter stres oksidatif secara konsisten dicatat pada enam bulan' durasi pengobatan dengan sistem pengiriman milk thistle khusus (2). Perbaikan pola stres oksidatif bertanggung jawab untuk meningkatkan pensinyalan insulin dan fungsi sel hati.
Berapa lama sebaiknya milk thistle diminum? (DOSIS Milk thistle)
Milk thistle dianggap aman dalam dosis 420 mg / hari secara oral dalam dosis terbagi hingga 41 bulan. Satu sumber menyarankan dosis harian 12 sampai 15 g buah kering untuk dispepsia dan gangguan sistem bilier, sementara ekstrak yang mengandung 200 sampai 400 mg / hari silymarin dianggap efektif dalam berbagai gangguan hati.
Manfaat Milk Thistle
1. Mendukung kesehatan hati
Salah satu kegunaan milk thistle yang paling umum adalah untuk mengobati masalah hati. Sebuah studi tahun 2016 menemukan bahwa milk thistle memperbaiki kerusakan hati yang disebabkan oleh diet pada tikus. Bukti lebih lanjut diperlukan untuk membuktikan bahwa milk thistle bermanfaat bagi hati manusia dengan cara yang sama, tetapi para peneliti berteori bahwa hal itu juga bermanfaat. Bahan aktif dalam milk thistle, silymarin, bertindak sebagai antioksidan dengan cara mengurangi produksi radikal bebas. Ilmuwan berpikir ini menciptakan efek detoksifikasi, itulah sebabnya milk thistle mungkin bermanfaat untuk masalah hati.
Sampai penelitian lebih lanjut dilakukan, bagaimanapun, milk thistle tidak direkomendasikan sebagai pilihan pengobatan utama untuk masalah hati. Tapi mungkin ini pengobatan pelengkap yang bisa membantu untuk dicoba.
2. Meningkatkan kesehatan kulit
Minyak milk thistle dapat digunakan secara topikal untuk meningkatkan kesehatan kulit.
Milk thistle dapat membantu meningkatkan kesehatan kulit. Sebuah studi tahun 2015 menemukan bahwa milk thistle membantu memperbaiki kondisi kulit yang meradang saat dioleskan pada kulit tikus.
Milk thistle juga ditemukan memiliki efek antioksidan dan anti-penuaan pada sel kulit manusia di lingkungan laboratorium dalam penelitian lain.
Penelitian lebih lanjut tentang manusia diperlukan untuk mengidentifikasi manfaat apa yang dapat diharapkan seseorang dari mengoleskan milk thistle ke kulit mereka.
3. Mengurangi kolesterol
Kolesterol tinggi dapat menyebabkan masalah kesehatan jantung dan meningkatkan kemungkinan seseorang terkena stroke.
Sebuah studi tahun 2006 menunjukkan milk thistle mungkin memainkan peran penting dalam menurunkan kadar kolesterol. Ditemukan bahwa kadar kolesterol lebih rendah pada orang yang memakai milk thistle untuk mengobati diabetes dibandingkan mereka yang memakai plasebo.
4. Mendukung penurunan berat badan
Penelitian hewan awal yang dilakukan pada tahun 2016 menemukan bahwa silymarin menyebabkan penurunan berat badan pada tikus yang diberi makanan yang dimaksudkan untuk menyebabkan penambahan berat badan.
Ini menunjukkan bahwa milk thistle mungkin bermanfaat bagi mereka yang ingin menurunkan berat badan. Namun, penelitian lebih lanjut tentang efek milk thistle pada penurunan berat badan pada manusia diperlukan untuk mengonfirmasi hal ini.
5. Mengurangi resistensi insulin
Sebuah studi pada tikus menemukan ekstrak milk thistle membantu mengurangi resistensi insulin. Resistensi insulin merupakan masalah bagi penderita diabetes tipe 2.
Meskipun penelitian ini menunjukkan milk thistle dapat berperan dalam manajemen diabetes, diperlukan lebih banyak penelitian untuk memastikan apakah milk thistle mengurangi resistensi insulin dan mendukung manajemen diabetes.
6. Memperbaiki gejala asma alergi
Bahan aktif dalam milk thistle dapat membantu mengurangi peradangan. Sebuah studi tahun 2012 menemukan bahwa silymarin membantu melindungi dari peradangan pada saluran udara tikus dengan asma alergi.
Diperlukan lebih banyak penelitian untuk melihat apakah silymarin bermanfaat bagi gejala asma pada manusia.
7. Membatasi penyebaran kanker
Milk thistle dapat membantu menghentikan penyebaran jenis kanker tertentu. Sebuah tinjauan tahun 2016 menemukan bahwa ekstrak milk thistle menghambat pertumbuhan sel kanker pada kanker kolorektal.
Diperlukan lebih banyak penelitian untuk menentukan bagaimana milk thistle dapat digunakan untuk membantu melawan kanker.
8. Mendukung kesehatan tulang
Teh milk thistle dapat membantu mencegah keropos tulang yang disebabkan oleh kekurangan estrogen. Milk thistle dapat memainkan peran penting dalam mendukung kesehatan tulang. Sebuah studi tahun 2013 menemukan bahwa milk thistle membantu mencegah pengeroposan tulang. Studi tersebut secara khusus mengamati pengeroposan tulang yang disebabkan oleh kekurangan estrogen. Belum jelas apakah milk thistle sama-sama bermanfaat untuk pengeroposan tulang dengan penyebab yang berbeda. Penelitian lebih lanjut diperlukan sebelum dapat menyimpulkan bahwa milk thistle mendukung kesehatan tulang pada manusia.
9. Meningkatkan kognisi
Sebuah studi tahun 2015 menemukan bahwa milk thistle meningkatkan ketahanan terhadap stres oksidatif. Stres oksidatif merupakan penyebab potensial penyakit Alzheimer.
Dengan cara ini, milk thistle dapat membantu meningkatkan kognisi dan mengobati kondisi degeneratif yang memengaruhi pikiran. Penelitian lebih lanjut tentang manusia diperlukan untuk mengkonfirmasi efek milk thistle pada kognisi.
10. Meningkatkan sistem kekebalan tubuh
Milk thistle dapat membantu memperkuat respons imun' membantu mereka melawan infeksi.
Sebuah studi tahun 2016 pada model hewan menemukan bahwa ekstrak milk thistle meningkatkan kekebalan saat dikonsumsi. Sebuah studi yang lebih tua menemukan bahwa ekstrak milk thistle memiliki efek positif pada respons kekebalan pada manusia.
Diperlukan lebih banyak penelitian dengan partisipan manusia sebelum para ilmuwan dapat mengatakan dengan pasti bahwa milk thistle meningkatkan sistem kekebalan seseorang.
Efek samping milk thistle
Milk thistle tampaknya memiliki sedikit efek samping, bahkan ketika dikonsumsi selama beberapa tahun. Beberapa orang mengalami mual, diare, gatal-gatal, dan kembung.
Untuk susu bubuk thistle curah, silakan hubungi kami diherbext@undersun.com.cn
Referensi: https: //academic.oup.com/chromsci/article/53/2/366/307144
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128093801000152
https://www.cambridgenaturals.com/blog/milk-thistle-food-for-the-liver
https://www.survivalsullivan.com/milk-thistle-extract/
https://www.webmd.com/digestive-disorders/milk-thistle-benefits-and-side-effects
https://www.medicalnewstoday.com/articles/320362#how-to-use-milk-thistle
